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递送CRISPR的壳聚糖纳米复合物的构建与研究

论文目录
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
常见缩略词表第8-13页
第一章 绪论第13-20页
    1.1 基因治疗简介第13页
    1.2 CRISPR基因编辑系统简介第13-15页
    1.3 CRISPR递送载体的研究进展第15-17页
    1.4 非病毒类载体材料壳聚糖第17-18页
    1.5 本文的主要贡献与创新第18页
    1.6 本文的结构安排第18-20页
第二章 CRISPR基因编辑质粒的构建及测定第20-31页
    2.1 材料与仪器第20-23页
        2.1.1 主要试剂材料第20-21页
        2.1.2 所需实验仪器第21-22页
        2.1.3 常用试剂的配制第22-23页
    2.2 实验方法第23-28页
        2.2.1 CRISPR基因编辑质粒的构建第23-26页
        2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备第26页
        2.2.3 连接产物的转化第26-27页
        2.2.4 连接产物的扩增第27页
        2.2.5 重组质粒的提取第27-28页
        2.2.6 重组质粒的基因测序第28页
    2.3 实验结果与讨论第28-29页
        2.3.1 CRISPR All-In-One表达质粒的浓度及纯度检测结果第28页
        2.3.2 CRISPR All-In-One表达质粒的基因测序结果第28-29页
    2.4 本章小结第29-31页
第三章 改性壳聚糖类载体材料TMC的制备与表征第31-37页
    3.1 材料与仪器第32-33页
        3.1.1 主要原料与试剂第32页
        3.1.2 所需实验仪器第32-33页
        3.1.3 常用试剂的配置第33页
    3.2 实验方法第33-34页
        3.2.1 改性壳聚糖类材料TMC的合成第33-34页
        3.2.2 ~1HNMR核磁共振波谱分析第34页
        3.2.3 傅立叶红外透射光谱分析第34页
    3.3 结果与讨论第34-36页
        3.3.1 TMC的~1H NMR结果第34-35页
        3.3.2 TMC的FT-IR结果第35-36页
    3.4 本章小结第36-37页
第四章 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的构建第37-45页
    4.1 材料与仪器第38-39页
        4.1.1 主要材料与试剂第38页
        4.1.2 所需实验仪器第38页
        4.1.3 常用试剂的配置第38-39页
    4.2 实验方法第39-41页
        4.2.1 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的构建第39-40页
        4.2.2 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的凝胶阻滞分析第40-41页
        4.2.3 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的动态光散射分析第41页
    4.3 结果与讨论第41-43页
        4.3.1 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的凝胶电泳阻滞情况第41-42页
        4.3.2 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的DLS评价第42-43页
    4.4 本章小结第43-45页
第五章 壳聚糖类材料对CRISPR的递送性能分析第45-58页
    5.1 材料与仪器第46-47页
        5.1.1 主要材料及试剂第46页
        5.1.2 所需实验仪器第46-47页
        5.1.3 常用试剂的配置第47页
    5.2 实验方法第47-52页
        5.2.1 细胞培养第47-49页
        5.2.2 转染细胞第49-51页
        5.2.3 流式细胞术检测转染效率第51页
        5.2.4 MTT比色法检测细胞生存率第51-52页
    5.3 结果与讨论第52-55页
        5.3.1 壳聚糖类材料介导CRISPR基因编辑质粒实现有效转染第52-54页
        5.3.2 壳聚糖类材料载CRISPR纳米复合物的安全性评价第54-55页
    5.4 本章小结第55-58页
第六章 全文总结与展望第58-61页
    6.1 全文总结第58-60页
    6.2 后续工作展望第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-68页
攻读硕士学位期间取得的成果第68页

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